次级键维系：疏水键、盐键、氢键、范德华力、二硫键
4.具有三级结构的亚单位，通过离子键、范德华力、氢键等聚集而成的特定构象
维持四级结构的作用有：氢键、疏水作用、静电作用、共价健
实验室常用分离分析蛋白质的方法有哪些？（盐析、凝胶过滤层析、聚丙烯酰胺凝胶电泳、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳原理、用途）
盐析：蛋白质在高浓度中性盐溶液中会沉淀析出，称为盐析，主要原理：高浓度盐离子与蛋白质分子争夺水化水，破坏蛋白质分子表面的水膜，同时盐离子也会影响蛋白质分子所带电荷，从而引起蛋白质沉淀但通常不会导致蛋白质变性。
    用途：使蛋白质浓缩，同时可除去少量杂质，并可将蛋白质粗提取液初步分为几份。纯化方法就属于粗分级。
分子筛层析：原理：称为凝胶过滤层析，以多孔性凝胶材料为支持物，当蛋白质溶液流经此支持物时，分子大小不同的蛋白质所受到的阻滞作用不同而先后流出，从而达到分离纯化的目的。
    用途：蛋白质细分级，按照蛋白质分子大小对蛋白质进行分离的。
离子交换层析：原理：蛋白质是两性分子，在一定的PH条件下带有电荷，不同的蛋白质所带有电荷的种类和数量不同，因此它们与带电的凝胶颗粒间的电荷相互作用不同，这样，当蛋白质混合物流经带电凝胶时，电荷吸引作用小的蛋白质先流过，而电荷吸引作用大的蛋白质后流过，从而把不同的蛋白质分开。
用途：离子交换层析层析分离蛋白质主要取决于各种蛋白质所带净电荷对不同蛋白质进行分离。
聚丙烯酰胺凝胶电泳：基本原理：聚丙烯酰胺凝胶灌装在双层玻璃板之间，在凝胶顶端上样，然后分别在凝胶的底部和顶端接上正负电极，在凝胶中形成电场，在电场的作用下，蛋白质由凝胶顶端向下移动，移动的速度与蛋白质所带电荷，分子大小和形状有关，从而把不同的蛋白质分开。
    用途：根据蛋白质所带电荷，分子大小和形状有关，从而把不同的蛋白质分开。
SDS-PAGE　变性聚丙烯酰胺凝胶电泳：
原理：在电泳系统中加入SDS，SDS与蛋白质结合后，会引起蛋白质变性，蛋白质的空间结构和特殊几何形状消失，变为棒状结构，所有伸展肽链与SDS的棒状复合物直径几乎相同，其差别只在于肽链的长短，由此消除了不同蛋白质分子形状的差异。SDS与蛋白质结合的数量很大，使蛋白质带上大量的负电荷，由此减弱或消除了不同蛋白质间电荷的差异，蛋白质在凝胶中的迁移速度只与分子大小有关。
    用途：SDS-PAGE大致按照肽链大小对不同蛋白质进行分离。
结构式：谷氨酸   半胱氨酸   天冬氨酸   丙氨酸（注意构型）
常见氨基酸三字母缩写要会：
名称    三字母缩写    名称    三字母缩写
丙氨酸    Ala    亮氨酸    Leu
精氨酸    Arg    赖氨酸    Lys
天冬酰胺    Asn    甲硫氨酸    Met
天冬氨酸    Asp    苯丙氨酸    Phe
半胱氨酸    Cys    脯氨酸    Pro
谷氨酰胺    Gln    丝氨酸    Ser
谷氨酸    Glu    苏氨酸    Thr
甘氨酸    Gly    色氨酸    Trp
组氨酸    His    酪氨酸    Tyr
异亮氨酸    Ile    缬氨酸    Val
已知氨基酸等电点、溶液PH，用离子交换树脂分离不同等电点氨基酸，判断氨基酸的洗脱顺序：
离子交换层析层析分离蛋白质主要取决于各种蛋白质所带净电荷，分为阳离子和阴离子交换层析。在进行离子交换层析时，时刻要想到这样的原则：处于等电点（pI）的蛋白质所带净电荷为零；当蛋白质所处溶液pH > pI时，该蛋白质带负电荷，如果pH < pI时，蛋白质带正电荷。
蛋白质分解代谢中氨基酸的脱氨基作用方式有哪些？
脱氨基作用主要在肝脏中进行
一．氧化脱氨基
第一步，脱氢，生成亚胺。第二步，水解。
催化氧化脱氨基反应的酶（氨基酸氧化酶）
二．非氧化脱氨基作用（大多数在微生物的中进行）
三．转氨基作用
转氨作用是a.a脱氨的重要方式，除Gly、Lys、Thr、Pro外，a.a都能参与转氨基作用。
转氨基作用由转氨酶催化，辅酶是维生素B6（磷酸吡哆醛、磷酸吡哆胺）。转氨酶在真核细胞的胞质、线粒体中都存在。
    转氨基作用：是α-氨基酸和α-酮酸之间氨基转移作用，结果是原来的a.a生成相应的酮酸，而原来的酮酸生成相应的氨基酸。
四．联合脱氨基
单靠转氨基作用不能最终脱掉氨基，单靠氧化脱氨基作用也不能满足机体脱氨基的需要，因为只有Glu脱氢酶活力最高，其余L-氨基酸氧化酶的活力都低。机体借助联合脱氨基作用可以迅速脱去氨基 。
以谷氨酸脱氢酶为中心的联合脱氨基作用
氨基酸的α-氨基先转到α-酮戊二酸上，生成相应的α-酮酸和Glu，然后在L-Glu脱氨酶催化下，脱氨基生成α-酮戊二酸，并释放出氨。
通过嘌呤核苷酸循环的联合脱氨基做用
骨骼肌、心肌、肝脏、脑都是以嘌呤核苷酸循环的方式为主
蛋白质合成代谢中：密码子及其特性：
①. 遗传密码子是三联体密码：一个密码子由信使核糖核酸（mRNA）上相邻的三个碱基组成。 　　
② 密码子具有通用性：不同的生物密码子基本相同，即共用一套密码子。 　　
③ 遗传密码子无逗号：两个密码子间没有标点符号，密码子与密码子之间没有任何不编码的核苷酸，读码必须按照一定的读码框架，从正确的起点开始，一个不漏地一直读到终止信号。